VESÍCULAS EXTRACELULARES DE ESPINAFRE: COMPARAÇÃO DE PROTOCOLOS DE LAVAGEM DE FLUIDO APOPLASTO
Palavras-chave:
Vesículas extracelulares, Espinafre, Fluido de lavagem apoplasto, Isolamento, ExtraçãoResumo
As vesículas extracelulares (EVs) vegetais apresentam potencial para aplicações biotecnológicas, mas sua obtenção depende de protocolos de extração adequados. Este estudo comparou três protocolos de lavagem do fluido apoplástico (AWF) de folhas de espinafre (Spinacia oleracea): Erlenmeyer (AWF-E), seringa (AWF-S) e ponteira (AWF-P). As EVs foram caracterizadas quanto ao tamanho e à concentração de partículas por TRPS, além do perfil proteico por SDS-PAGE e da concentração de proteínas pelo método BCA. Todos os protocolos permitiram obter EVs predominantemente entre 60 e 100 nm, sem diferença significativa na concentração de partículas. Entretanto, houve diferença significativa no rendimento proteico, com maior concentração no AWF-S (p = 0,005). Assim, o protocolo por seringa apresentou o melhor desempenho entre os métodos avaliados, embora todos apresentem elevada complexidade operacional e baixa escalabilidade.
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